植物组织培养
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2023年3月20日发(作者：甘肃舟曲)植物组织培养的基本步骤
成熟细胞离体——（脱分化）-—分生细胞——（分裂）—-愈伤
组织-—(再分化）——形态建成—-——完整植株.
培养基的主要成分
【水分】
【无机盐】1.大量元素：N，P，K，Ca，Mg，S（由相关的无机盐提供）
2。微量元素：Fe，B，Cu,Mn，Mn，Zn，Co
【有机营养成分】1。糖类2.维生素3.氨基酸4。肌醇5.天然有机
物
【植物生长调节剂】1.生长素2.细胞分裂素3。其他生长调节剂
【凝固剂】琼脂
【其他物质】1。活性炭2.抗生素3。抗氧化物质4。硝酸银
培养基和组织培养用具的灭菌方式
【培养基,无菌水】高压蒸汽灭菌，0。105MPa灭菌15~30分钟
【移栽基质】曝晒，甲醛熏蒸或高压蒸汽灭菌0.14MMPa灭菌1~2h
【接种室，缓冲室】紫外线灯照射30min,或气雾消毒剂
【超净工作台】紫外线灯30min，之后打开风机过滤除菌
【外植体】不同的化学消毒剂浸泡消毒
【接种工具】70％乙醇浸泡或擦拭，之后用火焰灼烧灭菌
【培养室】3％来苏尔喷雾,或甲醛，气雾消毒熏蒸
【皮肤】先用肥皂洗手,接种前用70%乙醇擦拭
【瓶口，管口】70%乙醇擦拭，用火焰封口
【培养瓶表面】70%乙醇擦拭
【台面，桌面】70%乙醇擦拭或喷雾消毒
植物外植体的灭菌方式
【茎尖,茎段，叶片】1.用70%乙醇浸泡30秒，再用无菌水冲洗1
次。2.用2％次氯酸钠浸泡15min或0。1％升汞浸泡5～10min.3。
若材料有绒毛，最好在消毒液中加入几滴吐温。
4.消毒时要不断震荡,使植物材料与消毒剂充分接触。5。最后用无
菌水冲洗3～5次。
【果实】1.用乙醇迅速漂洗一下，再用无菌水冲.2.用2％次氯酸
钠浸泡10min,用无菌水冲洗2～3次。
【种子】用10％次氯酸钠浸泡20~30min，或0.1%升汞消毒5～10min,
然后再用无菌水冲洗3~5次。
【花蕾】1。用70%乙醇浸泡10～15秒，无菌水冲洗一次。2.在漂
白粉中浸泡10min，用无菌水冲洗2～3次。
【根及地下部器官】用0.1%升汞浸泡5～10min或用次氯酸钠浸泡
10～15min,再用无菌水冲洗3～5次.
【消毒后的外植体应及时按照无菌操作技术接种在适宜的培养基上】