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人工合成肽 合成肽的反应式

发布时间:2023-06-16 作者:admin 来源:文学

人工合成肽 合成肽的反应式

人工合成肽 合成肽的反应式

五年级下册教学计划-读书主题的手抄报

2023年3月4日发(作者:胃痉挛自己会好吗)

高中生物多肽合成笔记手写

人工固相合成多肽一般是从序列的C端向N端逐个添加氨基酸。

昂拓莱司生物的多肽合成是基于PeptideSyn技术平台的Fmoc或Boc

法的多肽合成(两种方法的合成步骤是相同的,只是α-氨基保护基的

脱除方式不同)。

这里以Fmoc保护策略法举例说明。合成由下列几个步骤组成:

①挂树脂:根据订单选用并称取相应量的树脂,投入反应器中

溶胀备用。

②去保护:Fmoc保护的柱子和单体必须用20%piperidine去除氨

基的保护基团。

③检测:检测是否已经把保护基去除,既是氨基是否已经裸露

出来。(昂拓莱司生物常用茚三酮作为检测试剂,若结果是阳性,则

判定氨基裸露)

④激活和交联:下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。活

化的单体与游离的氨基反应交联,形成肽键。我们需要注意的是氨基

酸的投入量不是随意的。为保证肽链合成的准确性;氨基酸,缩合剂

以及碱是有一个比例的。这里提供一个参考比例。(规模(mol):

氨基酸:缩合剂:碱=1:3:3:6)

⑤检测:检测是否已经把所需氨基酸连上。结果是阴性,判定

氨基酸已经完全连上。

⑥循环:反复循环②-⑤直到合成完成。

⑦将合成的肽从树脂切割和去保护。(Fmoc策略用TFA(强酸)

即可将多肽从树脂上切下。)

固相合成肽链,为减少副反应的发生,选用的部分氨基酸的侧链

是用保护基团保护起来。但最终的成品只要肽链,既需要脱除保护基。

一般为了方便操作,根据肽链上的不同保护基预先配好切割液。(在

这里用昂拓莱司生物常用的其中一种切割液配比举例说明。E液配比:

87.5%TFA+5%茴香硫醚+2.5%纯水+2.5%苯酚+2.5%EDT)

⑧使用冰乙醚离心沉淀(至少要洗三遍);洗脱、冷冻干燥。

得出粗品进行MS检测和HPLC检测。

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