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MS培养基粉末 ms培养基的制备

发布时间:2023-06-16 作者:admin 来源:文学

MS培养基粉末 ms培养基的制备

MS培养基粉末 ms培养基的制备

徒法不足以自行-让人伤感的句子

2023年3月3日发(作者:放心的反义词)

实验一MS培养基母液的配制与保存

一、目的要求

1、通过MS培养基母液的配制,掌握配制培养基母液的基本技能;

2、掌握培养基各种母液的保存方法。

二、仪器与用具

1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱;

2、用具:烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签;

3、试剂:95%酒精,0.1-1NNaOH,0.1-1NHCl,配制MS培养基所需的各种无机物、有

机物,蒸馏水。

三、方法步骤

(一)母液的配制

母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍。

优点:(1)保证各物质成分的准确性;

(2)便于配置时快速移取;

(3)便于低温保藏。

1、MS大量元素母液(10×)

称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。

化学药品1升量10升量(10×)50升量(50×)

①NH

4

NO

3

1650mg16.5g

②KNO

3

1900mg19.0g

③CaCl2·2H2O(CaCl2)440mg()4.4g

④MgSO4·7H2O(MgSO4)370mg()3.7g

⑤KH

2

PO

4

170mg1.7g

2、MS微量元素母液(100×)

称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。

化学药品1升量10升量100升量(100×)

MnSO

4

·4H2O

(MnSO

4

·H2O)

22.3mg

(21.4mg)

223mg

(214mg)

②ZnSO4·7H2O8.6mg86mg

③H

3

BO

3

6.2mg62mg

④KI0.83mg8.3mg

⑤Na

2

MoO

4

·2H2O0.25mg2.5mg

⑥CuSO4·5H2O0.025mg0.25mg

⑦CoCl2·6H2O0.025mg0.25mg

注意:CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量(0.25mg×10=2.5mg)或100倍量(25mg)

称取后,定容于100ml水中,每次取10ml或1ml,即含0.25mg的量。

3、MS铁盐母液(100×)

称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。

化学药品1升量10升量100升量(100×)

Na

2

·EDTA37.3mg373mg

FeSO4·7H2O27.8mg278mg

注意配制时,两种成分分别溶解在少量蒸馏水中,其中EDTA盐较难完全溶解,可适

当加热。混合时,先取一种置容量瓶(烧杯)中,然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡,至产

生深黄色溶液,最后定容,保存在棕色试剂瓶中。

4、MS有机物母液(100×)

称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。

化学药品1升量10升量100升量(100×)

①烟酸0.5mg5mg

②盐酸吡哆素(VB6)0.5mg5mg

③盐酸硫胺素(VB1)0.1mg1mg

④肌醇100mg1g

⑤甘氨酸2mg20mg

5、生长调节剂

单独配制,浓度为1—5mg/ml(书中为0.5—1mg/ml),本实验要求配成1mg/ml。

配制培养基母液时注意事项:

①一些离子易发生沉淀,可先少量水溶解,在按配方顺序依次混合;

②配制母液时用蒸馏水或重蒸馏水;

③药品应用化学纯或分析纯;

④溶解生长素时,可用少量0.1—1N的NaOH或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.1

—1N的HCl加热溶解(如再加蒸馏水,易产生白色沉淀,此时可加入热水)。

(二)母液的保存

1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中,贴好标签,注明各培养基母液的名称、浓缩

倍数、日期、配制者。(注意将易分解、氧化者,放入棕色瓶中)例如:MS铁盐(100×),

2013.10.22,12生技班甲组

2、贮藏:4℃冰箱。

四、作业

1、写出实验报告。

2、配制培养基母液时应注意哪些事项?

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