
MS培养基粉末 ms培养基的制备
徒法不足以自行-让人伤感的句子
2023年3月3日发(作者:放心的反义词)实验一MS培养基母液的配制与保存
一、目的要求
1、通过MS培养基母液的配制,掌握配制培养基母液的基本技能;
2、掌握培养基各种母液的保存方法。
二、仪器与用具
1、仪器:各类天平、磁力搅拌器、冰箱;
2、用具:烧杯、量筒、玻璃棒、试剂瓶、标签;
3、试剂:95%酒精,0.1-1NNaOH,0.1-1NHCl,配制MS培养基所需的各种无机物、有
机物,蒸馏水。
三、方法步骤
(一)母液的配制
母液是欲配制培养基的浓缩液,一般配成比所需浓度高10—100倍。
优点:(1)保证各物质成分的准确性;
(2)便于配置时快速移取;
(3)便于低温保藏。
1、MS大量元素母液(10×)
称10升量溶解在1升蒸馏水中。配1升培养基取母液100ml。
化学药品1升量10升量(10×)50升量(50×)
①NH
4
NO
3
1650mg16.5g
②KNO
3
1900mg19.0g
③CaCl2·2H2O(CaCl2)440mg()4.4g
④MgSO4·7H2O(MgSO4)370mg()3.7g
⑤KH
2
PO
4
170mg1.7g
2、MS微量元素母液(100×)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品1升量10升量100升量(100×)
①
MnSO
4
·4H2O
(MnSO
4
·H2O)
22.3mg
(21.4mg)
223mg
(214mg)
②ZnSO4·7H2O8.6mg86mg
③H
3
BO
3
6.2mg62mg
④KI0.83mg8.3mg
⑤Na
2
MoO
4
·2H2O0.25mg2.5mg
⑥CuSO4·5H2O0.025mg0.25mg
⑦CoCl2·6H2O0.025mg0.25mg
注意:CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量(0.25mg×10=2.5mg)或100倍量(25mg)
称取后,定容于100ml水中,每次取10ml或1ml,即含0.25mg的量。
3、MS铁盐母液(100×)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品1升量10升量100升量(100×)
Na
2
·EDTA37.3mg373mg
FeSO4·7H2O27.8mg278mg
注意配制时,两种成分分别溶解在少量蒸馏水中,其中EDTA盐较难完全溶解,可适
当加热。混合时,先取一种置容量瓶(烧杯)中,然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡,至产
生深黄色溶液,最后定容,保存在棕色试剂瓶中。
4、MS有机物母液(100×)
称10升量溶解在100ml蒸馏水中。配1升培养基取母液10ml。
化学药品1升量10升量100升量(100×)
①烟酸0.5mg5mg
②盐酸吡哆素(VB6)0.5mg5mg
③盐酸硫胺素(VB1)0.1mg1mg
④肌醇100mg1g
⑤甘氨酸2mg20mg
5、生长调节剂
单独配制,浓度为1—5mg/ml(书中为0.5—1mg/ml),本实验要求配成1mg/ml。
配制培养基母液时注意事项:
①一些离子易发生沉淀,可先少量水溶解,在按配方顺序依次混合;
②配制母液时用蒸馏水或重蒸馏水;
③药品应用化学纯或分析纯;
④溶解生长素时,可用少量0.1—1N的NaOH或95%酒精溶解,溶解分裂素类用0.1
—1N的HCl加热溶解(如再加蒸馏水,易产生白色沉淀,此时可加入热水)。
(二)母液的保存
1、装瓶:将配制好的母液分别装入试剂瓶中,贴好标签,注明各培养基母液的名称、浓缩
倍数、日期、配制者。(注意将易分解、氧化者,放入棕色瓶中)例如:MS铁盐(100×),
2013.10.22,12生技班甲组
2、贮藏:4℃冰箱。
四、作业
1、写出实验报告。
2、配制培养基母液时应注意哪些事项?