
蛋白裂解液
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2023年3月19日发(作者:餐补)血清
WesternBlot
去除白蛋白
(Albumin)
应用
WesternBlotting
的方法检测血清中某种蛋白的含量是
,
最关键的问题是要将血清做怎
样的电泳前处理
.
一般的处理方式
:
1.常规分离血清
,
即取血后常温放置
,
使其凝固
,
然后3000rpm15min
离心
,
取上清即可。
2.
测血清蛋白浓度。
3.
用
Laemmlibuffer
(蛋白裂解液)稀释至所需浓度,我一般为
5ug/ul.
4.
加入适量
loadingbuffer
,
100
℃煮
5
分钟。注意:有时会出现水煮后,蛋白液变得
非常粘稠,这时可以在
65
℃煮
10-20minutes
以替代沸水煮。
PS
:对于目标蛋白在血清中含量很低,或者目标蛋白分子量与白蛋白或球蛋白分子量相
近的情况下,必烦要去除血清中的白蛋白和
/
或球蛋白,以下是知名厂商
G-Biosciences
提供的试剂盒,使用较为简便,同时价格也不贵哦。
美国G-Biosciences-AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒
血浆和脑脊髓液等样本中,包含大量的白蛋白,从而封闭掉在二维凝胶电泳中发现和鉴定其
他低丰度蛋白的可能。AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒被设计用来在这种样本中大量去除白
蛋白。
这种白蛋白去除方法是基于白蛋白和Cibachron蓝色染料的结合。AlbuminOUT™被优化从样
本中去除人的白蛋白。AlbuminOUT™使用快速离心柱方法,每个柱子含有0.2ml的染料结合
树脂,从而可以结合大于2mg的人白蛋白。AlbuminOUT™可以从5-50微升人血浆中去除大
于98%的白蛋白。
离心柱形式可以在10分钟内去除白蛋白。高结合力的蓝色染料结合树脂可以从人,猪,羊,
狗,兔,大鼠和牛样本中达到瞬间的结合和去除白蛋白。AlbuminOUT™或许也可以从其他物
种中去除白蛋白。适用于处理25或50个样本。
Figure1:2Danalysisofwholehumanserumbefore(left)andafter
(right)treatmentwithAlbminOUT™.
产品特点:
从样本中不到10分钟的时间内去除白蛋白
基于白蛋白和Cibachron蓝色染料的结合
每个柱子的结合力大于2mg的人白蛋白
从5-50微升人血浆中去除大于98%的白蛋白
应用:
从生物学样本比如血浆和脑脊髓液中去除白蛋白
产品信息:
产品货号产品名称包装
786-251AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒25Preps
786-251TAlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒4Preps
786-252AlbuminOUT™白蛋白去除试剂盒50Preps