
放线菌培养基
放射痛-弯头规格及尺寸对照表
2023年2月22日发(作者:接触网)放线菌的培养和形态观察
摘要本实验目的是学习并掌握放线菌的培养方法,初步了解放线菌的形态特征。以青色链
霉菌(Streptomycesglaucus)和弗氏链霉菌(Streptomycesfradiae)为实验材料,利用高
氏I号培养基进行培养,采用插片法制片,用高倍镜观察其菌丝及孢子丝形态。【1】青色链霉
菌(s)的菌落呈青灰色,菌丝颜色较浅,孢子丝螺旋形;弗氏链霉菌(e)
菌落呈暗黄色,菌丝颜色较浅,孢子丝较菌丝粗且直。
关键词放线菌观察插片法菌丝孢子丝
引言放线菌是能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌,其菌丝(包括基内菌丝
和气生菌丝)及孢子丝有着各种不同的形态,以孢子进行繁殖。实验主要是观察其菌丝与孢
子丝,为了保证菌丝与孢子丝的完整,实验采用插片法培养放线菌。菌丝与孢子丝之间的区
别比较明显,很容易区分,观察时需要注意的是它们的形态与位置关系。
1材料和方法
1.1材料
1.1.1菌种
青色链霉菌(s),弗氏链霉菌(S.
fradiae)。
1.1.2培养基
髙氏I号培养基:可溶性淀粉2gKNO3
0.1gK2HPO40.05gMgSO4•7H2O
0.05gNaCl0.05gFeSO4•7H2O
0.001g(母液)琼脂2g蒸馏水100mL
pH7.2~7.4
1.1.3仪器和其他用品
平板培养皿,盖玻片,镊子,酒精灯,显
微镜,擦镜纸,接种环等。
1.2方法【1】
1.2.1配制培养基按配方配制100ml高
氏I号培养基,并与培养皿一起高温灭菌
30min。
1.2.2制作培养基平板
1.2.3接种无菌操作分别在青色链霉菌
和弗氏链霉菌高氏Ⅰ号培养基上挑取菌种
在制备的高氏Ⅰ号培养基平板上密集划线
接种。
1.2.4插片无菌操作用镊子取灭菌盖玻
片以约45°角插入平板琼脂接种线上。
1.2.5培养将平板倒置,于28℃培养
7d。
1.2.6菌落形态观察。
1.2.7镜检用镊子小心取出盖玻片,用
纸擦去背面培养物,有菌面朝上放在载玻片
上,通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜观
察。
2结果与分析
2.1实验结果
2.1.1观察青色链霉菌(s)(见图1,
2)
培养基上的菌落呈青灰色,因为密集划线
接种,无法分辨菌落形态。
显微视野中首先可以观察到分布较复杂
的菌丝,较透明较细的是基内菌丝,基内菌
丝分布于整个视野中,且拥有错综复杂的分
支;菌丝中颜色较深的菌丝是气生菌丝(图
1,2)。螺旋式的孢子丝(图2)。
图1青色链霉菌菌丝及孢子丝1(10×40)
图2青色链霉菌菌丝及孢子丝2(10×100)
2.1.1观察弗氏链霉菌(e)(见图3,4)
培养基上的菌落呈暗黄色。
显微视野中同样菌丝复杂分布,有很
多分支,但是与青色链霉菌明显不同
的是孢子丝是直的而不是螺旋式,孢
子丝内可以观察到正在形成的孢子(图
3,4)。
图3弗氏链霉菌的菌丝及孢子丝(10×40)
图4弗氏链霉菌的孢子丝及孢子(10×100)
2.2结果分析
把盖玻片插到放线菌生长的培养基中,
放线菌会沿着盖玻片与培养基交界的区域
生长到盖玻片上,因此经过培养后,可通过
观察盖玻片观察到自然状态下的放线菌菌
丝,实验中观察到的菌丝就是菌丝的正常形
态。
由于培养方法的限制,观察菌丝时只能
大体根据菌丝的颜色和形状来大体判断基
内菌丝和气生菌丝。观察时孢子丝比较容易
找到,比如青色链霉菌的孢子丝螺旋状,弗
氏链霉菌的孢子丝长且直,高倍镜下还可观
察到孢子。
3.小结
本实验包括放线菌的培养与观察,掌握
了放线菌的培养方法,了解了放线菌菌丝及
孢子丝的自然生长形态特征。在实验过程
中,要注意划线时要紧密,插片时要垂直于
划线,保证菌种能着生在盖玻片上;显微观
察时宜用略暗光线,使菌丝更容易观察;操
作过程中勿碰动菌丝体,以免影响菌丝的自
然状态;制片时,要尽可能使菌面朝上,以
免破坏菌丝体。实验的关键步骤和注意事项
是影响实验结果的主要因素,做好充分预
习,对实验方法要明确。
参考文献