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放线菌培养基

发布时间:2023-06-07 作者:admin 来源:文学

放线菌培养基

放线菌培养基

放射痛-弯头规格及尺寸对照表

2023年2月22日发(作者:接触网)

放线菌的培养和形态观察

摘要本实验目的是学习并掌握放线菌的培养方法,初步了解放线菌的形态特征。以青色链

霉菌(Streptomycesglaucus)和弗氏链霉菌(Streptomycesfradiae)为实验材料,利用高

氏I号培养基进行培养,采用插片法制片,用高倍镜观察其菌丝及孢子丝形态。【1】青色链霉

菌(s)的菌落呈青灰色,菌丝颜色较浅,孢子丝螺旋形;弗氏链霉菌(e)

菌落呈暗黄色,菌丝颜色较浅,孢子丝较菌丝粗且直。

关键词放线菌观察插片法菌丝孢子丝

引言放线菌是能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌,其菌丝(包括基内菌丝

和气生菌丝)及孢子丝有着各种不同的形态,以孢子进行繁殖。实验主要是观察其菌丝与孢

子丝,为了保证菌丝与孢子丝的完整,实验采用插片法培养放线菌。菌丝与孢子丝之间的区

别比较明显,很容易区分,观察时需要注意的是它们的形态与位置关系。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1菌种

青色链霉菌(s),弗氏链霉菌(S.

fradiae)。

1.1.2培养基

髙氏I号培养基:可溶性淀粉2gKNO3

0.1gK2HPO40.05gMgSO4•7H2O

0.05gNaCl0.05gFeSO4•7H2O

0.001g(母液)琼脂2g蒸馏水100mL

pH7.2~7.4

1.1.3仪器和其他用品

平板培养皿,盖玻片,镊子,酒精灯,显

微镜,擦镜纸,接种环等。

1.2方法【1】

1.2.1配制培养基按配方配制100ml高

氏I号培养基,并与培养皿一起高温灭菌

30min。

1.2.2制作培养基平板

1.2.3接种无菌操作分别在青色链霉菌

和弗氏链霉菌高氏Ⅰ号培养基上挑取菌种

在制备的高氏Ⅰ号培养基平板上密集划线

接种。

1.2.4插片无菌操作用镊子取灭菌盖玻

片以约45°角插入平板琼脂接种线上。

1.2.5培养将平板倒置,于28℃培养

7d。

1.2.6菌落形态观察。

1.2.7镜检用镊子小心取出盖玻片,用

纸擦去背面培养物,有菌面朝上放在载玻片

上,通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜观

察。

2结果与分析

2.1实验结果

2.1.1观察青色链霉菌(s)(见图1,

2)

培养基上的菌落呈青灰色,因为密集划线

接种,无法分辨菌落形态。

显微视野中首先可以观察到分布较复杂

的菌丝,较透明较细的是基内菌丝,基内菌

丝分布于整个视野中,且拥有错综复杂的分

支;菌丝中颜色较深的菌丝是气生菌丝(图

1,2)。螺旋式的孢子丝(图2)。

图1青色链霉菌菌丝及孢子丝1(10×40)

图2青色链霉菌菌丝及孢子丝2(10×100)

2.1.1观察弗氏链霉菌(e)(见图3,4)

培养基上的菌落呈暗黄色。

显微视野中同样菌丝复杂分布,有很

多分支,但是与青色链霉菌明显不同

的是孢子丝是直的而不是螺旋式,孢

子丝内可以观察到正在形成的孢子(图

3,4)。

图3弗氏链霉菌的菌丝及孢子丝(10×40)

图4弗氏链霉菌的孢子丝及孢子(10×100)

2.2结果分析

把盖玻片插到放线菌生长的培养基中,

放线菌会沿着盖玻片与培养基交界的区域

生长到盖玻片上,因此经过培养后,可通过

观察盖玻片观察到自然状态下的放线菌菌

丝,实验中观察到的菌丝就是菌丝的正常形

态。

由于培养方法的限制,观察菌丝时只能

大体根据菌丝的颜色和形状来大体判断基

内菌丝和气生菌丝。观察时孢子丝比较容易

找到,比如青色链霉菌的孢子丝螺旋状,弗

氏链霉菌的孢子丝长且直,高倍镜下还可观

察到孢子。

3.小结

本实验包括放线菌的培养与观察,掌握

了放线菌的培养方法,了解了放线菌菌丝及

孢子丝的自然生长形态特征。在实验过程

中,要注意划线时要紧密,插片时要垂直于

划线,保证菌种能着生在盖玻片上;显微观

察时宜用略暗光线,使菌丝更容易观察;操

作过程中勿碰动菌丝体,以免影响菌丝的自

然状态;制片时,要尽可能使菌面朝上,以

免破坏菌丝体。实验的关键步骤和注意事项

是影响实验结果的主要因素,做好充分预

习,对实验方法要明确。

参考文献

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