过氧化氢酶试验
人称的作用-桑果汁
2023年2月21日发(作者：活法读后感)高锰酸钾滴定法之南宫帮珍创作
1.试剂配制：
(1)0.3%过氧化氢溶液：①（1：10030%的H2O2和水）
②2O2+49.5ml蒸馏水）
③（1ml30%H2O2+99ml蒸馏水）
(2)3N硫酸：（10ml硫酸+50ml水）
4+100ml蒸馏水）
2.高锰酸钾的标定：
准确称取约0.2g在110℃干燥至恒量的基准草酸钠。加入250
mL新煮沸过的冷水、10mL硫酸，搅拌使之溶解。将草酸钠溶液
加热到75℃~85℃(即开始冒蒸气时的温度)，趁热用待标KMnO4
溶液进行滴定。开始滴定时反应速度很慢，待溶液中发生Mn2+
后，反应速度加快，但滴定时仍必须是逐滴加入，至溶液呈粉红
色，半分钟内不褪色即为终点。注意滴定结束时的温度不该低于
60℃。
2MnO4
-+5C2O4
2-+16H+75~85℃Mn2++10CO2+8H2O。
参考：《高锰酸钾尺度溶液标定方法的改进及注意事项》王继莲
3.测定：
准确称取2g风干土置100mL锥形瓶→加入40mL蒸馏水和5
mL0.3%过氧化氢（现配），另设对照(40mL蒸馏水和5mL0.3%
过氧化氢)→在往复式振荡机上振荡20min→加入5mL3N硫酸
（以稳定未分解的H2O2）→用慢速型滤纸过滤，→
4．结果计算
土壤的过氧化氢酶活性，以单位土重的0.1NKMnO4毫升数(对照
与试验测定的差)暗示。
备注：
以容量法测H2O2的酶活：Kappen（1913）首先介绍硫酸存在下用
高锰酸钾滴定剩余的过氧化氢测定酶活。此法根据H2O2与土壤相
互作用时，未分解的H2O2的数量用容量法（经常使用高锰酸钾滴
定未分解的H2O2）测定H2O2的酶活
2KMnO4＋5H2O2＋3H2SO4→2MnSO4＋K2SO4＋8H2O＋5O2
土壤H2O2酶促过氧化氢的分解有利于防止它对生物体的毒害作
用。