pi染色
河马井-烦恼都是自找的
2023年2月21日发(作者：潜水设备)产品说明书
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
PI染色试剂盒
产品组成：
产品编号
BB-4136
规格
200-400assays
PI染色液
1ml
试剂B
10ml
说明书
1
产品简介：
BestBio贝博PI检测试剂盒可用于细胞凋亡检测，也可用于普通的细胞核染色以及某些
特定情况下的双链DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。Propidium
Iodide是一种DNA结合性染料，其激发和发射波长分别为488nm和630nm，产生红色荧光，
但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。因此，在荧光显微镜下观察，正常细胞
不能着色，早期凋亡细胞呈微弱红光，晚期凋亡细胞红光加强，坏死细胞呈强红色荧光。也
可采用流式细胞仪利用细胞形态上的改变影响它们的光散射特性改变进行分析，还可与
RNaseA结合进行细胞周期分析。
使用方法：
本染色试剂盒用于细胞染色分析，也可用于石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片的检测。石
蜡切片用常规方法脱蜡、分化、冰冻切片用冰丙酮固定后检测。以下以培养细胞的荧光显微
镜检测为例，细胞染色可用预冷的70%的乙醇固定，4℃，1—2小时，也可不固定，其他方
法请参阅相关资料。
染色缓冲液的配制：根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。取100μL试剂B加900
μL无菌去离子水稀释，混匀即成染色缓冲液。
荧光显微镜观察
1、收集细胞，PBS洗涤细胞一次，2000rpm离心5分钟，用染色缓冲液重悬细胞，调
整细胞浓度约为106个/ml；
2、取100ul细胞悬液，加入2-5ulPI染液，轻轻混匀；
3、4℃避光放置5min后，滴加于载玻片上，加盖玻片；
4、荧光显微镜检测。
流式检测：
1、收集细胞，PBS洗涤细胞一次，2000rpm离心5分钟，用染色缓冲液重悬细胞，调
整细胞浓度约为106个/ml；
2、500ul细胞悬液中加入5ulPI染液；
3、4℃避光放置30min；
4、流式细胞仪检测。
产品说明书
本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！
结果分析：
置于荧光显微镜下用488nm激发光观察结果：正常细胞不能着色，早期凋亡细胞呈微弱
红光，晚期凋亡细胞红光加强，坏死细胞呈强红色荧光。
流式检测用氩离子激发荧光，激光光波波长为488nm，发射光波波长大于630nm，产
生红色荧光分析PI荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。在前散射光
对侧散射光的散点图或地形图上，凋亡细胞与正常细胞相比，前散射光降低，而侧散射光可
高可低，与细胞的类型有关；在分析PI荧光的直方图时，先用门技术排除成双或聚集的细
胞以及发微弱荧光的细胞碎片，在PI荧光的直方图上，凋亡细胞在G1/G0期前出现一亚二
倍体峰。如以G1/G0期所在位置的荧光强度为1.0，则一个典型的凋亡细胞样本其亚二倍体
峰的荧光强度为0.45，可用鸡和鲑鱼的红细胞的PI荧光强度做参照标准，两者分别为0.35
和0.7，可以确保在两者之间的不是细胞碎片而是完整的细胞。
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