he染色步骤
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2023年3月16日发(作者：关于国庆节的作文)HE染色和吉姆萨染液
试剂和方法如下。
一、HE染色试剂：苏木素染液：苏木精1g；无水乙醇25mL；硫酸铝钾10g；蒸
馏水350mL；碘酸钾0.1g；冰醋酸10mL。A液：用25mL无水乙醇溶解1g苏木精，摇动
即可溶解。B液：用350mL蒸馏水溶解10g硫酸铝钾，摇动或振荡即可溶解。把A液和B
液混合，加入碘酸钾摇动至颜色加深。最后加入10mL冰醋酸，摇动颜色变为深葡萄酒红色。
染液配制当日即可应用于染色。酸化液：醋酸20-35mL加蒸馏水至700mL。伊红染液：
储液：取1g伊红，溶于100mL95%的乙醇，待溶解完全后加几滴冰醋酸至染液呈半透明状，
避光保存备用。工作液：取一定量的伊红储液，加入等量70%乙醇，此液即为伊红染液的
工作液。染色步骤：（1）细胞爬片放用PBS漂洗3次，每次5min，无水乙醇固定5min，
风干。（2）95%乙醇1min，75%乙醇1min，三蒸水1min。(3)浸洗5%的醋酸
液(酸化液)数秒。(4)苏木精染液3-5min，胞核呈橙红色。(5)自来
水冲洗至颜色变蓝。(6)盐酸乙醇液分化数秒，颜色再次返红。(7)自来水
再次冲洗，返蓝。(8)伊红染液5min，流水漂洗15min左右。二、吉姆萨染色试剂：
吉姆萨染液配制：取吉姆萨粉末1g溶于66ml甘油中研磨混匀，然后放置55-60℃
水浴2h，冷却后加入66ml甲醇中混匀，过滤后棕瓶分装保存。PBS甲醇液：PBS与
甲醇一比一混合。染色步骤：（1）细胞爬片使用PBS漂洗3次，每次5min。（2）加
PBS甲醇液静置2min，去掉PBS甲醇液。
（3）加甲醇固定10min，去掉甲醇，加入新无水甲醇漂洗去掉。（4）加吉姆萨染液2ml/25cm2，
2min后加入8ml水稀释并晃动染液2min，去掉染液。（5）流水冲洗10~20s，湿润时观
察。