2024年3月31日发(作者:)

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本说明书供Nikon倒置显微镜ECLIPSE TS100/TS100-F操作人员使用,介绍了该显微镜的基本操作。
为确保正确使用,在使用该仪器前,请仔细阅读使用说明书。
未经尼康许可,不得翻印或转载本使用说明书的部分或全部内容。
不经声明亦有可能更改本使用说明书的内容。
虽然已尽力确保本使用说明书的准确无误,但是,如果仍然有不明之处或不正确之处,请与就近的尼康代理商联系。
您所购产品的配套可能同本说明书提及的部件和附件有所差别。
需阅读与显微镜配套产品的使用说明书。
● HOFFMAN MODULATION CONTRAST SYSTEM是MODULATION OPTICS inc.(光学有限公司)的注册商标。
E-1
目录
安全提示 4
英语 4
德语 9
法语 14
西班牙语 19
意大利语 24
荷兰语 29
丹麦语 34
葡萄牙语 39
芬兰语 44
希腊语 49
系统操作常识 54
I 部件名称 56
II 操作部件名称 57
III 显微术 58
1. 观察方法 58
2. 相衬显微术 60
3. 霍夫曼调制相衬显微术 62
4. 明视场显微术
65
IV 各部件操作
66
1. 孔径光阑
66
2. 标本和载物台
67
67
72
74
74
75
75
3.
4.
5.
6.
1) f35-mm 培养皿
2) 观察悬浮细胞 67
3) 使用机械载物台 67
4) 使用大的容器 68
调焦装置 68
滤色片 69
物镜 69
1) Ph 标记 69
2) MC 标记 69
3) 带校正环的物镜 70
4) 盖玻片厚度 70
5) 油浸物镜 70
霍夫曼调制相衬方法 72
1) 霍夫曼调制相衬系统
2)
微调照单显TV 相相镜微机制术(头照或相仅反相数码针衬对光原TS100-F相装相72
理
7. 显
1)
2)
3)
)
机
置
机
E-2
V 安装 76
1. 基本套件的安装 76
2. 非基本套的安装 79
VI 故障 81
VII 保养与维护 86
VIII 技术规格 87
E-3
安全提示
本使用说明书中所使用的警告与注意符号
虽然Nikon产品的设计为您在使用过程中提供了最高的安全性,但是,不正确的使用方法或对本使用说明书的无视都可能造成人身伤害及财产损失,并最终遭受违反授权声明中所述的处罚。为了您的安全,请在使用本仪器之前仔细通读本使用说明书,不要丢失本使用说明书并将其保管在产品附近以便随时参考。
在本使用说明书中,安全提示是用以下符号表示的。请务必遵守以下这些符号的提示,以确保操作的正确和安全。
符号 含义
警告 无视此符号的提示有可能导致重伤或死亡
注意 无视此符号的提示有可能受伤或财产损失。
E-4
仪器上的符号含义
在使用的整个过程中,要求必须注意符号指示内容
在操作任何标注有此符号的部件前,要求阅览相关说明书
符号 含义
注意!生物危害
此符号标记于载物台上,并提醒注意如下:
。警告:注意容器中的样品溅出,防止有生物危害
。为了避免生物危害污染,不要直接用手触摸污染部分。
。根据实验室的标准程序来降低污染
注意!高温
此符号标记于灯室盖上,提醒注意如下:
在使用过程中与熄灯后的一段时间内灯泡及其周围(包括灯室盖)会保持
高温,为防止烫伤,在亮灯或熄灯后不要接触灯泡及其周围
注意!
此符号标记于AC电源输入旁边,并提醒注意如下:
。在开启显微镜电源前,检查输入电压(位于AC输入口的正右方的铭牌上已给出输入电压)
。发往美国的显微镜电压已在出厂时设定为“120V”
。如果所示电压不同于您所在地的标准电压,切忌开启电源。
按以下操作进行:
与铭牌上的电压不同 请立即与就近的尼康代理商联系
与AC输入设定不同 请参考p.76改变输入电压的设定
E-5
警告
1. 1 指定产品用途
2. 本产品主要用于细胞及微生物活动的科学研究,在医疗部门用于病理研究或标本检测.
2 不要分解
分解会造成故障、触电或损伤,所有必要的操作在说明书中都有叙述,不要拧
松任何螺钉或者强行打开任何盖子,除非说明书中有指示(注意:由于拆散造
成的故障不属于产品保修范围)。如果你遇到问题请与就近的尼康代理商联系。
3 输入电压
保证显微镜上两处显示的输入电压(铭牌与显微镜后部AC输入的右边)与你
所处电压相一致。如果当地电压与显微镜所需电压不同,请不要使用显微镜,这
时请按以下指示(不正确电压下使用显微镜,由于过载会造成过热,易引起火灾
和损坏显微镜):
● 如果铭牌上所示电压与当地电压不同,则不要打开电源,请立即与就近的尼
康代理商联系。
● 如果AC输入口右侧所示电压与当地电压不同,则在打开电源前按P.21上
的描述改变输入电压设置,输入电压按如下值设定:
● 如果铭牌上标为“100/110/120V~”,则输入电压设定为100, 110 或
120V AC(工厂设定为120V AC) 。
● 如果铭牌上标为“220/230/240V~”,则输入电压设定为220, 230或
240V AC(工厂设定为240V AC) 。
E-6
警告
4 使用指定的灯泡、保险丝和电源线
只能使用指定的灯泡、保险丝和电源线,使用其它的灯泡、保险丝或电源线会损坏
显微镜或发生火灾,(关于电源线详细说明见P.33)。
当使用加长电源线,确保其有接地保护线,并连接牢固。
。 指定灯泡:卤素灯6V-30W(PHILIPS 5761)。
。 指定保险丝: 250V, 1A, 延时型, 高熔断型5x20小型保险丝2个。
5 光源发热
当灯泡点亮时和灯泡关闭30分钟内,请不要接触灯室,因为此时灯泡很热。
。 在更换灯泡之前要让灯泡足够地冷却下来(关闭灯泡后至少30分钟)。
。 为了避免破裂,当灯泡点亮时或在切断电源的30分钟之内,切勿接触热灯泡或
它的周围部分。
。 为避免火灾,当灯泡点亮时或在切断电源的30分钟之内,灯室及周围严禁放置
布料,纸张以及像汽油、苯、稀释液或酒精之类的易燃、易爆物品。
6 危险样品
本显微镜应该主要被用来在培养皿、微量滴定板等器皿上进行活体细胞与组织的显微观
察与操作。
操作样本时,要确定样品是否具有危害性。
操作危险样品应根据实验室标准程序进行。如果样品具有传染特性,注意穿戴好橡胶手
套防止传染,仔细操作避免样品飞溅。万一样品从容器中飞溅到显微镜上,必须根据
实验室标准程序净化已污染部分。
E-7
注意
1 安装显微镜、更换灯泡和保险丝、插拔电源线时请切断显微镜电源
为防止触电或火灾,在插拔电源线之前总是应切断显微镜电源。同样,当安装显微
镜或更换灯泡、保险丝时显微镜电源应切断。
2 不要使显微镜受潮或使外来物质进入内部
如果显微镜受潮,会导致短路,使显微镜损坏或发热,同样外部物质进入内部也会
发生短路。如果你不小心将液体溅到显微镜上,请立即切断显微镜电源,并拔 出 电源线(同时不要用湿手去碰电源线)之后,用干布擦去水分。
如液体溅到塑料罩上,用薄纸从左边槽中吸去水分,再用角板手取下塑料罩,擦去
内部的水分,检查一下灯泡电线接头或后面板上的AC输入口,如果有水,就把它
擦干。
如果液体或外来物质进入里面,请勿使用显微镜,并与就近的尼康代理商取得联
系。
3 显微镜的处置
为防止生物危害,需要依据实验室标准程序将显微镜作为易受污染的设备来处置。
E-8
系统操作常识
1. 安装或存放场所
显微镜是精密光学仪器,在不合适条件下使用或存放仪器会损坏或对其精密
度有不利的影响。选择安装场所要注意以下条件:
● 避免在阳光或室内灯光直接照射下的地方及其它明亮处安放仪器。因为在
明亮环境下,使外界光线进入物镜会影响成象质量。
● 选择温度从0到40℃和湿度为85%的场所。(如果安放在高温高湿的场所,
透镜将会结雾或发霉,降低性能或损坏仪器)。
● 安放场所不应有污物和灰尘。
● 安放场所要平坦,避免振动。
● 在稳固且能承受仪器重量的桌子上安装。
● 本显微镜有微弱的电磁波辐射。如果靠近精密电子仪器使用,其精度有可
能受到不良影响。如果显微镜影响电视或收音机的接收,请其远离显微镜。
2. 搬运显微镜
显微镜是精密光学仪器,要小心轻放,不要使它受到强力冲击,特别是物镜任何轻
微的撞击都会造成其精度上的降低。
● 当搬运仪器时,要切记用双手抱住其底座
的前部和后部。
● 当搬运仪器时,不要用手抓握调焦旋钮、
目镜筒、载物台等部位。这样会使这些部
件脱落,从而损坏显微镜。
3. 灯泡安装
。不要用手去接触灯泡玻壳,以免弄脏、降低性能、损坏灯泡或减少灯泡的寿
命。当安装灯泡时,请戴上手套或用布片包着。如果玻璃表面有污迹,请用清
洁的布蘸酒精轻轻将它擦去。
。不要使灯泡受到撞击或振动。否则,会损坏或缩短灯泡的寿命。
E-54
。当更换灯泡时,检查其接触是否完好。如果有损坏,灯泡可能会不亮或造 成过热。同样,灯泡插入插座时要确保牢固可靠。如果灯泡安装不正确,会
因接触不良造成脱落、过热、冒烟。更换灯泡后一定要装上灯室盖。
。用过的灯泡不要打碎,要做为特殊的工业废物或根据当地市政废物处理系统的
相关法律进行处理。
4 调焦手轮
左右调焦手轮不要同时互相反方向旋转。
同样,也不要在载物台上升高或降低到极
限位置时继续旋转粗调焦手轮。这样的误
操作会损坏显微镜。
5 物镜
当观察在容器中的悬浮细胞时,为了适当
地调焦,必须将物镜比平常更紧密地靠近
容器。如果此时转换物镜,将会碰到容器
的底部。所以,旋转物镜转换器之前要降
低物镜。
同样,在载物台上放置大容器之前,要确
保物镜顶端不超出载物台表面。
6 Ø35-mm 培养皿
在使用Ø 35mm培养皿时,应将其放在具有圆形孔的载物环上,如果放在
具有长孔的载物环上,培养皿可能会从孔洞中掉落。
7 纯酒精
当用纯酒精擦去浸油时,请按工厂所提供的说明书操作。 保持易燃液体远离火
种和电火花。
E-55
III 显微术
1 显微术
1) 打开电源
将显微镜电源打开,点亮灯泡(按下电源开关后半部),用亮度调节钮来调节视
场亮度(顺时针旋转增加亮度;反之亮度降低)。
当使用TS100-F时,在调节视场亮度之前,将光路转换旋钮转至“BINO”。
2) 瞳距调节
旋转目镜筒,调节两目镜筒之间距离,使左右两个像重合成一个像(此项调节随着操作
者两眼之间距不同而变化)。
3) 将屈光度调节环设置在刻线位置
旋转右目镜上的屈光度调节环,使屈光度O线对准刻线,同样方法使左目镜屈光度调
节环上的O线对准刻线。
4) 充分打开孔径光阑
移动聚光镜上孔径光阑手柄至最右边,使光阑充分打开。
5) 放置标本
将标本放置在载物台上,调整其位置,使容器(底厚均匀)的中心移入光路。
当使用Ø 35mm直径的培养皿,需将它放在具有圆形孔的载物环上,然后再放在载物台上,以防掉落。
(当利用其它容器请参见P.67)。
E-58
6) 屈光度调节
根据您的左右两眼视力来调节目镜屈光度,一旦调节
完成,则物镜的性能得到充分发挥,包括齐焦特性。
(1) 如果安装了相衬滑板或HMC滑板,则将空档进入 光路或干脆将滑板从
聚光器上取下。
(2) 把10X物镜转入光路,旋转粗调焦旋钮,然后再微调,使标本进入焦面成像。
(3) 把40X物镜转入光路,旋转粗微调焦手轮对标本聚焦(40X物镜有校正环,则调节
其环以补偿容器的厚度,详细请参见P.70)。
(4) 重新将10X物镜转入光路,用右眼通过右目镜来观察,调节屈光度调节环对标本
聚焦。此时,切不可转动调焦旋钮。
(5) 用左眼通过左目镜来观察,调节屈光度调节环对标本聚焦,此时,切不可转动调焦
旋钮。
(6) 重复步骤(3)至步骤(5)。
(7) 如果相衬滑板或HMC滑板被取下,则重新将滑板插入 以恢复原样。
7) 标本观察
利用最佳显微术来观察标本
相衬显微术, 见P.60。
霍夫曼调制相衬显微术,见P.62。
明视场显微术,见P.65。
8) 关闭灯泡
按电源开关的前半部切断电源,关闭灯泡,待灯泡完全冷却后,用塑料罩盖好显微镜以防落灰尘。
E-59
2 相衬显微术
为实现相衬显微术,下面这些部件必须具备:
一个ELWD聚光镜;用于相衬显微术的物镜;一个相衬滑板(可调中心的或不可调中心的);对应物镜Ph标记的环形光阑;一个GIF滤色片和一个对中望远镜(仅用于可调中心相衬滑板)。
1) 安装ELWD聚光镜
将ELWD聚光镜安装在照明立柱上。
2) 安装相衬滑板
将相衬滑板插入聚光器(当你打算使用Ph2物镜,则先将环形光阑Ph2物镜放在相衬滑板上)。
3) 插入GIF滤色片
将GIF滤色片放入滤色片座中(可选的)。
GIF滤色片将改善相衬图像的对比度。
4) 充分打开孔径光阑
将孔径光阑手柄移到最右端,充分打开孔径光阑,使用相衬显微术时,孔径光阑总是处
于完全打开状态。如果孔径光阑关闭,阻止了环形光阑,相衬效果无法获得。
E-60
5) 环形光阑调中心(仅适用于可调中心相衬滑板)
对环形光阑中心调整使其与物镜的相位环同心。实现此调整,需将容器(厚度均匀)的
中心置于光路中,避免将容器的边缘部分置于光路中。
(1) 将10X相衬物镜Ph1移入光路中。
(2) 推动相衬滑板使Ph1环形光阑进入光路。
(3) 不要改变屈光度调节环,然后将一只目镜移出目镜
筒,在此筒内插入一个对中望远镜。
(4) 握住对中望远镜,旋转对中望远镜上的目镜,使其对焦于物镜的相位环。
(5) 在相衬滑板上的两个调节螺孔中插入两把六角螺丝起子,通过对中望远镜观察并旋
转螺丝起子以调整Ph1环形光阑的像,使其与相位环同心。
(6) 如果你使用的ph标记物镜不是Ph1物镜 ,那么将与物镜相同标记的Ph环形光阑转入光路,用与上述相同的方法调整环形光阑中心。
6) 选择所希望的相衬物镜
旋转物镜转换器,将所需放大倍数的相衬物镜转入光路(旋转物镜转换器时,
注意定位准确)。
7) 将与物镜对应的环形光阑移入光路
将与物镜Ph标记相同的Ph环形光阑移入光路,因为所用的容器厚度的区别会导致光学条件变坏,环形光阑的中心可能会位移,如果对比度突然变坏,检查一下设置条件,如果有必要,再次调整环形光阑中心。
8) 调整物镜上的校正环
如果物镜有校正环,则根据所用容器的厚度来调整校正环,详细请参见P.70。
E-61
3 霍夫曼调制相衬(HMC)显微术
为实现HMC显微术,下面这些条件必须具备:
一个HMC聚光镜;HMC物镜;一个HMC滑板(狭缝光阑)和对中望远镜。
1) 安装HMC聚光镜
将HMC聚光镜安装在照明立柱上。
2) 安装HMC滑板
将HMC滑板插入聚光镜(如果HMC滑板上没有安装狭缝光阑,则先将它装上,详细见P.79)。
3) 取下滤色片
如果滤色片座中有滤色片,那么取下滤色片或连滤色片座也一起取下。
4) 充分打开孔径光阑
将孔径光阑手柄移到最右端,充分打开孔径光阑,使用HMC显微术时,孔径光阑总是处于完全打开状态;如果孔径光阑关闭,遮断了狭缝光阑,就无法获得专属的图像。
E-62
5) 狭缝光阑定向
狭缝光阑定向使其与HMC物镜调制板(焦面图形)长边平行并重迭。
(1) 将10X HMC物镜(MC1)移入光路。
(2) 推动HMC滑板,使MC1狭缝光阑进入光路。
(3) 不要改变屈光度调节环,然后小心将一只目镜移出目镜筒,在此筒内插入一个
对中望远镜。
(4) 握住对中望远镜,旋转对中望远镜上的目镜,使其对焦于物镜调制板(焦面图
形)和狭缝像。
(5) 转动物镜上的调制环使调制板处在你所希望的方向上,小心不要改变物镜校正
环的位置。此时,可观察到狭缝光阑的像相对于调制板的相对位置。
(6) 将MC1狭缝光阑移出光路,然后利用一个六角螺丝起子,顶住狭缝光阑圆周
的槽中,使其旋转直至其长边平行于调制板上的G区域(再将MC1狭缝光阑 进入光路检查两者是否平行,最后微调可以通过旋转调制环来实现)。
(7) 在HMC滑板上的调中心螺孔上,插两把六角起子,然后,通过对中望远
镜来观察调整直到狭缝像正确地与调制板的G区域像重迭。
(8) 如果你使用具有标记MC的物镜而不是标记为MC1的物镜,那么将与物镜相 同标记的MC狭缝光阑转入光路,用与上述相同的方法进行狭缝光阑定向。
E-63
6) 选择所需的HMC物镜
旋转物镜转换器将所需放大倍数的HMC物镜移入光 路(旋转物镜转换器
时,请注意定位正确)。
7) 将与物镜对应的狭缝光阑放入光路中
将与物镜相同MC标记的狭缝光阑放入光路中观察,根据需要,可以用旋转容器
来改变标本的方向,或者在需要时可改变狭缝和调制板的方向。
8) 调节物镜上的校正环
如果物镜有校正环,则根据所用容器的厚度来调整校正环,详细请见P.70。
补充说明:
如果您的标本如下图(a)所示,调制板和狭缝光阑的方向要加以注意
由溶液边界所形成的折射面有大的梯度,当溶液边界垂直于调制板的对比度方向(获得
的对比度方向),由于非常强的对比度,使标本像不能清楚地观察到(见图(b)),此时,
旋转调制板,使得对比方向平行于溶液边界(见图(c))。随之狭缝位置也要作相应调
节。
E-64
4 明视场显微术
1) 将环形光阑和狭缝光阑移出光路
如果显微镜上已安放了相衬滑板或HMC滑板,则将滑板空档移入光路或将滑板取
出。
2) 插入NCB滤色片
将NCB11滤色片插入滤色片座中,使照明变为白光。因为色温随灯泡电压而变,
旋转亮度调节钮直到背景颜色变白;如果视场太亮,则将ND滤色片放入滤色片座。
3) 选择所需的物镜
旋转物镜转换器将所需放大倍数的物镜转入光路(旋转物镜转换器时,请注意定位
正确)。
4) 调节孔径光阑
调节孔径光阑,使其大小为物镜数值孔径数的70%到80%。
孔径光阑详细调节请见P.71。
注意:孔径光阑装在聚光镜上,如果聚光镜被移走后孔径光阑就无法调节。
E-65
IV各部分操作
1 孔径光阑孔径光阑是用来调节照明系统的数值孔径(N.A)
2 孔径光阑的大小决定了光学分辨率、亮度、对比度和景深。缩小孔径光阑就降低了鉴别率和亮度,而增加了对比度和景深。因为这些特性是相互关联的,不可能单独控制,因此孔径光阑的调节因各种标本的应用而定。
3
4 孔径光阑的调节对明视场显微术、微分干涉相衬显微术和显微照相术而言尤为重要,一般而言,孔径设置为物镜数值孔径的70%到80%,能得出一个适当的对比度好的图像。
5
6 实际上通过目镜筒观察孔径光阑的像就能调整其大小,向左旋孔径光阑调节杆,则就关闭光阑,反之孔径光阑打开。
7
8 取出目镜插入对中望远镜,握住对中望远镜并旋转其目镜来调焦,出现一个亮的物镜出瞳和孔径光阑像。(如果看不到孔径光阑像,则将其进一步缩小)当看到孔径光阑的像时,调节孔径光阑杆直至其大小达到物镜出瞳的70%到80%。
9
10 当进行相衬显微术时,应确保孔径光阑总是处于全打开状态,如果孔径光阑关闭,将遮断环形光阑,相衬效果无法实现。
11
12 当进行HMC显微术时,应确保孔径光阑总是处于全打开状态,如果孔径光阑关闭,阻止了狭缝光阑,无法获得好的HMC显微图像。
E-66
2 标本和载物台
1) 圆孔和长环孔托板
在使用小的容器如Ø 35mm的培养皿时,应将其放在具有圆形孔的托板上,如果
放在具有长环孔的托板上,培养皿可能会从孔洞中掉落
用相应大容器时,如微孔板,应装置长环孔托板。
2) 观察悬浮细胞
当观察容器中的悬浮细胞时,为得到正确的聚焦,必须将物镜比平常更紧密地靠近容器,如果此时转换物镜,会碰到容器的边缘。因此,旋转物镜转换器之前,先要降低物镜高度。
3) 使用机械载物台
安装机械载物台详情请见P.80,转动机械载物台手轮的上部可使其作前后移动,而旋转
手轮的下部可使其作左右移动,注意不要弯曲容器托板框,因为它配有一块薄板。
96-孔板可直接插入托板框内,用多种托板可将其它类容器插入托板框内。
E-67
4) 使用大的容器
当使用长方形容器时,在载物台两侧装上辅助平台,
使观察更为稳定(详细见P.80)。
当使用大而厚的容器时,去掉聚光镜,将容器安放在载物台上,此时,只能进行简单的明视场显微观察。
在放置大容器之前,应先确认物镜顶部不要超过载物台的平面。
3 调焦装置
您可以沿着图示方向旋转调焦旋钮来上下移动物镜。
手轮的转动和物镜的移动之间的关系如下所示:
转动微调焦手轮一个刻度值可使物镜移动2mm,
转动微调焦手轮一整圈可使物镜移动0.2mm,
转动粗调焦手轮1/10圈可使物镜移动3.8mm,
粗微调焦旋钮可使物镜从参考位置向上7mm,向下3mm的行程。
转动位于右侧粗调焦手轮内侧的粗调焦扭矩调节环,可以调节粗调焦手轮的旋转扭矩。逆时针旋转调节环可以增加扭矩,反之减少扭矩。此扭矩在出厂时预调好。用户可用此来调节扭矩,但不能调得过松,否则物镜转换器会因为自身的重量而自由落下
不要同时互相以反方向旋转左右调焦钮,或当载物台达到极限位置后继续转动粗调焦手轮,这样会造成显微镜的损坏。
E-68
4 滤光片
在灯室的滤色片盒内最多能放入两块滤色片,根据使用要求可选用如下滤色片.
当使用HMC显微术时,切记要将所有滤色片移出光路
ND2滤光片 用于一般显微术和显微照相术的亮度调节。
亮度减少1/2,(透过率约为50%)。
ND8滤光片 用于一般显微术和显微照相术的亮度调节。
亮度减少至1/8,(透过率约为12.5%)。
NCB11色温平衡片 用于一般显微术和显微照相术(日光型)的色温校正。
当进行具有钨丝灯型的彩色或单色显微照相术时,请将其移出光路。
GIF 绿色干涉滤色片。
用于单色光的相衬显微术和单色显微照相术的对比度改善。
隔热滤光片 用于降低照明光在标本上的热辐射影响。
用于观察一些对热量非常敏感的标本,尽管在显微镜内已有内置式隔热片。
5 物镜
1) Ph标记
用于相衬显微术的每个物镜上都标有Ph标记(PhL、Ph1或Ph2),不管用什么放大倍数的物镜,都要确保插入标有与进入光路中物镜相同Ph标记的环形光阑,这样才能实现相衬显微术。(在观察之前,使用可调中心的相衬滑板,则环形光阑必须被调中心),尼康公司也有用于相衬显微术的标有Ph3的Ph标记的物镜,但这种物镜用于高倍应用,不能用于TS100/TS100-F型显微镜的相衬观察。
2) MC标记
用于HMC显微术的每个物镜上都标有MC标记(MC1,MC2或MC3),不管用什么放大倍数的物镜,都要确保插入标有与进入光路中物镜相同MC标记的狭缝光阑,这样才能实现HMC显微术,(在观察之前,狭缝光阑位置必须与HMC物镜调制板对准)。
E-69
3) 具有校正环的物镜
倒置显微镜多数用于通过实验托盘或培养皿底部观察标本(玻璃或塑料都可),对于这种应用,由于底部厚度的差异,正常物镜(盖玻片厚度为0.17mm)不能提供清晰图像,显微镜的性能也得不到充分发挥,此时,应用一个具有校正环的物镜来补偿底部厚度。
但有校正环的物镜并不能补偿边缘厚度不一致的容器,我们建议只用于均匀厚度的补偿。
校正环的调节
1) 调节校正环的值与容器底部厚度相一致,这个厚度尺寸将是由计量所得或者是容器的制造厂标出的。
2) 用调焦手轮对标本调焦。
3) 当图像分辨率或对比度较差时,稍微将校正环在顺时针方向或逆时针方向作旋转。当校正环被旋转,标本像会稍微有一些离焦,则用微调焦旋钮对标本再作微调焦。
4) 如分辨率和对比度有了改善,则顺着同一方向,将校正环进一步旋转,同时再一次调焦,反之,则反方向将校正环按以前所转的两倍量作旋转,并再一次调焦这样,如获得较好的图像,则顺相同方向旋转校正环,反之,反方向将旋转校正环,反复操作直至找到最佳像点为止。
校正环处于0mm时,适用于没有盖玻片标本的显微术。
我们建议将校正环上最清晰的位置作个记录,这对你以后使用不同底部厚度的容器有帮助。
4) 盖玻片厚度
指定的盖玻片厚度在每个物镜上都已标注(“∞/0.17”表示盖玻片厚度为0.17mm)。一个具有0.17 标记的物镜,放置标本时,使盖玻片(0.17mm厚度)面对物镜,(对于倒置显微镜而言,放置标本时,使盖玻片朝下),一个具有1.2mm标记的物镜,是对载玻片厚度而言,放置标本时,使载玻片面对物镜,(对于倒置显微镜而言,放置标本时,使盖玻片朝上)。当您在高倍下观察在培养器皿中的标本时,由于器皿底部的厚度与指定的厚度不一致,因此,建议应使用带有盖玻璃片校正环的物镜以校正玻璃厚度的误差。
5) 油浸物镜
物镜顶部有一道黑环且镜体上部标有“Oil”的是油浸物镜,观察时应用Nikon浸油在物镜与标本之间加注浸油,实现荧光显微术使用油浸物镜时,应使用无荧光油。
E-70
不允许有气泡存在
当加注浸油时,注意不要在油中间夹有气泡,气泡的出现会降低像质,为了检查气泡的存在,移去一个目镜,充分打开孔径光阑,看物镜的出瞳,(由于有气泡,会出现一个亮圆斑)。如果观察有困难, 就在目镜筒中插入一个对中望远镜,旋转其目镜来进行调焦。
如果在油中有气泡,则用下列方法之一去除:
● 轻轻地旋转物镜转换器,将浸有油的物镜左右移动一次到两次。
● 加注更多的油。
● 除去浸油,重新加注新的油。
处理浸油
使用尽量少的油,如果用油过多,油将流向载物台和其它部件上.
在油浸物镜上或在干式物镜上沾有任何一点油都会给观察带来负面影响。使用结束后,擦净所有的油,确保其它物镜的顶部没被油沾污。
利用沾有酒精溶液(乙醇或甲醇)的镜头纸轻轻地擦3到4遍以擦去浸油,为使物镜擦得更干净,镜头纸同一部位不能反复使用,用干镜头纸再次擦就能得到好的结果。
警告
当使用无水酒精溶液时,请按厂方提供的程序,将易燃液体远离火种或电火花保管。
使用浸油时的防护
● 使用后确保拧紧瓶盖,在加注完浸油后,请拧紧瓶盖,因为使用时间长后它自身会松动,应定期检查以免浸油泄漏。
● 在瓶上不要过度施压,以防油从中喷出。
● 请擦去使用过程中沾在瓶外面的油。
● 确保油不要到眼睛里去,虽然Nikon浸油是无毒的,如果油碰到皮肤或进入眼睛请用下列方法来处理。
◇ 接触到皮肤:用肥皂水冲洗。
◇ 进入眼睛:用纯净水冲洗(至少15分钟)或找医生检查。
● 不要将浸油放在室外光线(紫外线)直射的地方。
E-71
6 霍夫曼调制相衬方法
1) 霍夫曼调制相衬系统
霍夫曼调制相衬系统由Hoffman博士设计,它给您一个稳定的浮雕图像,在观察塑料容器中的标本时,效果比微分干涉相衬显微术更好(DIC显微术),但又不同于DIC,您能看到塑料容器中的标本,因为本系统不需要用偏光来照明。
霍夫曼调制相衬系统在TS100/TS100-F中由两个部分组成,一个称之为调制板(放在HMC物镜的后焦面上),另一个是狭缝光阑(安置在HMC 滑板上),(TS100、TS100-F的HMC系统是一个固定相衬系统,因而不需要偏振片)。
调制板(物镜)和狭缝光阑是成对构成的,在使用前要检查一下调制物镜与狭缝光阑MC标记(MC1,
MC2,MC3)是否相同,如果两者不匹配,那么就得不到正确的图像。
2) 调制相衬原理
因为人眼和胶片所捕捉到的是光强或颜色不同的物体,它们却不能看到无色透明的细胞或细菌,这些无色透明的物体称为“相位物体”,因为当光线穿过此类物体后仅仅发生光的相位上的改变。
用染色能使相位物体变得可见,但它们的生命也将失去了,为了观察这些具有生命的相位物体,发明了微分干涉相衬和相位相衬显微术,同样也就发明了调制相衬显微术,调制相衬显微镜在普通显微镜的光学系统中增加了一些使得透明标本转变成光强变化的部件,这些增加的部件调制了穿过标本的光线的振幅,从而改变了光的强度,形成一个可见的图像(在微分干涉相衬和相位相衬显微术中,相位物体转变为光强度变化是因为光线穿过标本没发生相位的变化而产生干涉的结果)。
让我们设想一下,光是如何穿过标本的,因为相位物体相对于周围物质有不同的折射率,光在其边界就发生折射(如图1示,一个不规则四边形上光线的折射),每一种标本都发生同样情况。
E-72
图2表示了调制相衬的原理,在聚光镜孔径上有一个狭缝光阑,HMC物镜中有调制板,(调制板是一块放在HMC物镜出瞳处的灰度滤色片,它被分成三个区域,一个暗区,一个半暗区和一个透明区)。如果在标本平面上没有任何物体,那么光通过调制板的半暗区,出现半暗效果。如果相位物体存在,光线通过相位物体时,在标本边缘的光线会发生折射,其结果会使光线超出半暗区而进入暗区或亮区,于是,光线随着进入的区域的变化而引起明暗的变化,这样相位物体就变得可见了。
调制相衬显微术中的图像与微分干涉相衬显微术相同,也出现浮雕感。但值得注意的是此处没有双折射效应。因此您能看到标本,而没有双折射效应。
E-73
7 显微照相术(仅针对TS100-F )
当使用TS100-F时,可以在垂直镜筒上直接安装显微照相或CCD装置等,即可得到照片或在TV监视器上观察图像。
当使用落射荧光附件时,由于荧光很微弱,为获得满意的荧光图片,我们建议使用具有内置高灵敏曝光测量的显微照相装置。
(当进行荧光照相时,透射照明装置光源要切断)。
请阅读CCD或显微照相装置的随机操作说明书。
1) 单镜头反光相机
用单镜头反光相机,35mm胶片获得照片必须按如下配置并按下列顺序安装:
<1> 显微照明垂直镜筒(用两个锁紧螺钉固定)。
<2> PL镜头(投影目镜)。
<3> TMS-F接口。
<4> 尼康单镜头反光照相机机身(建议型号:FE10)。
(注意不能使用F401和F50D这两种型号,因为电气连接是不同的)。
<5> 取景目镜盖。
<6> 快门线。
<7> 35mm胶卷。
(1) 观察标本,确保照明均匀,(如照明不均匀,则正确调整)。
(2) 把光路转换到垂直镜筒上,(光路选择钮设置为PHOTO)。
(3) 当明视场显微观察时,调整聚光镜上的孔径光阑。
(4) 打开照相机电源开关。
(5) 通过照相机取景器,确定取景范围,然后进行调焦。
(6) 设定曝光时间,当手动照相时,按曝光表把快门设置一合适位置或用自动曝光时设置成“A”的状态。
为防止拍照时相机反光镜带来的震动,调整亮度使得快门速度降低到1/8秒以下
降低曝光时间可以消除震动带来的不清楚图象
(7) 为防止外部光线的进入,将取景器盖盖在取景器上。
(8) 按动快门时,为避免振动,可使用快门线。
E-74
2) 显微照相装置
用35mm显微照相装置获得照片,必须按如下配置,并
按下列顺序安装:
当心
不要将大幅面照相机背放在显微照相装置上,因为这样重心就会提高,显微镜就不稳定。
<1> 显微照相垂直镜筒(用两个锁紧螺钉固定)。
<2> PL镜头(投影目镜)。
<3> 显微照相装置。
<4> 35mm胶卷。
(1) 观察标本,确保照明均匀,(如照明不均匀,则正确调整)。在透射照明条件下,当光路中已插入了NCB11色温平衡片或颜色校正滤色片时,可用调整亮度手柄以获得适当的颜色,利用ND减光片 来调整光亮度。
(2) 把光路切换到垂直镜筒上,(光路选择钮设置为PHOTO)。
(3) 用明视场显微术观察时,调整聚光镜上的孔径光阑。
(4) 打开显微照相装置电源开关。
(5) 通过显微照相装置的取景器,确定像的构成,进行调焦。
(6) 设定光亮度,取得适当曝光时间。
(7) 按动快门(遥控快门键)。
3) TV相机或数码相机
(1) 所连接C接口的照相机,其重量小于等于1kg。
(防止显微镜倾倒)
(2) 接其它所需的装置,根据照相机操作说明书所给
出的程序安装,如TV显示屏和视频打印机。
E-75
V 安装
在安装显微镜之前一定要阅读“安全指南常识”这一章以及如下的所有程序,为了避免
触电,在安装之前要按动电源开关前半部,以切断电源。
1基础部分安装
所需工具:
平起子(用来改变电压)
1) 确认输入电压
要确保在显微镜后板面的铭牌所示的电压与AC输入口的右边所示的电压和你所在区域的当地电压相同。如果所在区域当地电压与显微镜所需电压不符,则不能使用显微镜,此时请按如下程序操作,如果在不正确电压下操作显微镜,会由于过载而造成过热从而导致火灾和损坏显微镜:
● 如果铭牌上所示的电压与当地电压不符,请不要接通电源,请与就近的尼康代理商联系。
● 如果AC输入口的右边所示电压与当地电压不符,请
在接通电源之前,按如下所示改变电压:
● 如果铭牌所示为“100/110/120V~”, 则输入电压
可设置为交流100,110或120V AC。
● 如果铭牌所示为“220/230/240V~”, 则输入电压
可设置为交流220, 230或240V AC。
转换电压
(1) 按下电源开关前半部以切断电源,如果已接上电源
请将电源线拔下。
(2) 用平起子将保险丝座取出。
(3) 取出保险丝,拉出保险丝座内的电压选择器。
(4) 设置电压选择器使得在保险丝座的窗口内显示的电
压与所用的市电电压相符。
(5) 重新安置保险丝及保险丝座,恢复原样。
E-76
2) 保险丝更换
为了避免触电或仪器的损坏,在更换保险丝之前确保显微
镜的电源已被切断(按动电源开关的前半部),拔出电源
线。
只能使用指定保险丝,否则可能造成火灾或仪器的损坏。
指定保险丝: 两个250-V, 1-A延时型 高熔断 5x20
小型保险丝
(1) 按动电源开关前半部以切断电源,如果已接上电源请将电源线拔下。
(2) 用一字起子将保险丝座取出。(见P.76)
(3) 取出保险丝,重新安装新的保险丝。
(4) 确认保险丝座的窗口上所显示的电压与实际输入电压相符。
(如果不同,请根据P.76 所示的程序,改变电压的设置)
(5) 将保险丝座放回原来位置。
3) 安装(更换)灯泡
为了避免烧伤或触电,当更换灯泡时,确保电源已被切断
并拔出电源线,并在打开灯室盖之前要让灯泡和灯室足够
冷却。
只能使用指定灯泡,如果使用了其它型号的灯泡会
损坏仪器或导致火灾。
指定灯泡: 6V-30W 卤素灯(PHILIPS 5761)
(1) 按住灯室盖前后两侧往上拔,将其取下。
(2) 戴手套或拿一块布握住灯泡,紧紧地将其插入灯座的
孔中,尽可能地插进一点。
(3) 重新将灯室盖盖在原来位置。
(4) 将电源线插入显微镜后部的插座内。
E-77
4) 安装聚光镜
将聚光镜插入照明柱上,用指紧螺钉固定。
5) 安装物镜
从载物台上面,将物镜拧入物镜转换器,顺时针旋转 物镜转换器时,安装的物镜倍数从小到大。
6) 安装目镜
双目镜筒上取下目镜护盖,装上两个相同倍数的目
镜。
7) 连接电源线
确认显微镜电源已被切断,(即电源开关的前半部已被按下)将指定电源线的插座一端连接显微镜的AC输入口,而另一端插入AC电源输出口,确保连接牢 固。
● 使用指定的电源线。若使用其它电源线会造成设备损坏或火灾。
● 若使用加长的电源线,应确保其有接地保护线,连接牢固。
以上是基本套的安装。
E-78
2 非基本套件的安装
1) 相差显微镜部件
实现相衬显微术必须要有如下部件:一个ELWD聚光镜;相衬物镜;相位滑板(包括可调中心或不可调中心);环形光阑Ph2(当使用Ph2物镜时);GIF滤色片和对中望远镜(在使用可调中心相衬滑板时)。
聚光镜和物镜的安装方法和基础部分安装相同。对中望远镜的详细说明在“Ⅲ显微术”这一章中讲过。
如你要使用有Ph2标记的物镜则请将环形光阑Ph2装入相衬滑板,然后将此滑板插入
聚光器滑板插孔中。
2) HMC显微镜部件
实现HMC显微镜必须要有如下部件:一个HMC聚光镜; HMC物镜;HMC滑板;狭缝光阑和对中望远镜。
采用在基础部分安装中的相同方法,安装聚光镜和物镜,对中望远镜的详细说明请见
“Ⅲ显微术”这一章中所述。
取下已插入的狭缝光阑,首先要旋松调中螺杆,抓住圆周提起它,注意不要碰到狭缝表面区域。
旋下滑板上一端的手柄,然后将板插入聚光镜滑板插孔中,再将已拆下的手柄重新装上。
E-79
3) 机械载物台
(1) 如果载物台上安装着托板,请先取下。
(2) 剥去用于运输的防护带(两处)。
(3) 松开装运锁定块的固定螺钉。
(4) 将机械载物台放在显微镜的载物台上,用2个内六
角螺栓从载物台底部将其固定。
(5) 取走机械载物台的运输锁定块。
4) 辅助平台板
用安装机械载物台螺钉孔来固定辅助平台。
E-80
VI故障
即使仪器未被损坏,误操作会对显微镜的性能造成不利的影响。如果有以下现象产生,在向尼康服务机构提出咨询之前,您可按以下表中去找出可能发生的原因,如果利用以下表格不能解决的问题,那请您找就近的尼康代理商。
1 光学问题
视场模糊,视场仅仅部分可见,不均匀照明或图像太暗
● 物镜转换器未准确定位(物镜不在光路中)。
使物镜转换器的定位准确,并使物镜处在光路中。
● 灯泡安置不当。
正确安置灯泡。(P.77)。
● 灯泡电压太低。
利用亮度调节钮使视场变亮。 (P.58)。
● 镜片上有污物或灰尘(聚光镜、物镜、目镜)。
清洁镜片。 (P.86)。
● 载物台上的标本夹持器处在光路中。
移动标本夹持器。
● 相衬滑板(或HMC滑板)处在中间位置。
使滑板定位准确。
● 滤色片安置不当。
检查滤色片盒。 (P.60)。
HMC观察时须将所有滤色片移出光路。
● 光路转换钮的位置错误。
旋转光路转换钮选择所需使用的光路。(P.57)。
视场上有污物或灰尘
● 镜片脏了(聚光镜,物镜,次物镜或目镜)。
清洁镜片(P.86)。
● 标本脏了。
清洁标本。
E-81
像质不好(没有相位对比效果,对比极差或分辨率差)
● (相衬显微术)在光路中没有环形光阑。
使用一个与物镜相匹配的环形光阑(P.61)。
● (相衬显微术)物镜与环形光阑不匹配。
所用的物镜和环形光阑要有相同的Ph标记。
● (相衬显微术)环形光阑的像与物镜相板中心不同心。
调整环形光阑中心(P.61)。
● (相衬显微术)孔径光阑被关闭。
完全打开孔径光阑(P.60)。
● (HMC显微术)在光路中不是HMC物镜。
把HMC物镜转入光路。
● (HMC显微术)物镜与狭缝光阑不匹配。
所用的物镜和环形光阑要有相同的MC标记。
● (HMC显微术)狭缝像没有落在调制板的G区域。
调整狭缝像的位置(P.63)。
● 聚光镜位置有误。
确认聚光镜在照明立柱上位置正确。
● 培养皿底部太厚。
使用底部厚度约为1.2mm的培养皿。
● 物镜校正环位置不正确(使用具有校正环的物镜时)。
调整校正环与容器厚度相匹配 (P.70)。
● 镜片弄脏了(聚光镜,物镜,次物镜或目镜)。
清洁镜片。(P.86)
E-82
2 操作问题
将物镜升到最高极限仍然达不到焦面
● 标本表面离载物台表面太远。
使标本表面离载物台近一些。
用20X或40X物镜不能对焦
● 培养皿底部太厚。
使用底部厚度等于或小于2mm的培养皿。
双目镜观察时左右像不能重合
● 需要调整瞳距。
调整瞳距(P.58)。
观察时眼睛感到疲劳
● 需要调整屈光度。
调整左右眼的屈光度(P.59)。
调焦后经过一段时间物镜离焦
● 粗调焦旋钮扭矩太松。
旋转粗调扭矩调节环以增大扭矩直至物镜转换器不会因自重而落下(P.68)。
E-83
3 电气问题
打开电源开关时灯泡没点亮
● 没电。
把电源线分别插入显微镜的AC输入口和电源输出口,打开电源开关。(P.78)
● 灯泡没有安装。
装上灯泡(P.77)。
● 灯泡已烧坏。
更换灯泡(P.77)。
● 没有使用指定灯泡。
使用指定灯泡(P.77)。
● 保险丝已断。
更换保险丝(只能用指定保险丝)(P.77)。
● 灯泡导线未接上。
将灯泡导线连接到显微镜后部的插座上(P.77)。
亮度变化
● 当地电压起伏太大。
使用带符合当地安全规章的稳压器的AC电源。
灯泡闪烁,亮度不稳定
● 灯泡将被烧毁。
更换灯泡(P.77)
● 接触不良。
确保所有连接牢固。
● 保险丝座没装好。
确保保险丝座装好(P.77)。
● 室内电压起伏不稳定。
使用带符合当地安全规章的稳压器的AC电源。
● 灯泡在灯座上未插牢。
插牢灯泡(P.77)。
E-84
灯泡很快就烧毁
● 没有使用指定灯泡。
使用指定灯泡。
● 输入电压有误。
设置电压选择与当地电压相匹配(P.76)。
E-85
VII保养与维护
1 镜片清洁
● 用软刷子或软纱布擦去镜片上的灰尘。
● 可以用软的布、镜头纸或纱布轻微地蘸一些纯洒精溶液(乙醛或甲醇)擦拭一些手指印、油脂等顽固的污物。
● 不能用纯酒精以外的其它溶液,因为它们会损伤镜片的表面膜层。尤其禁止使用汽油擦拭滤片和次级物镜。
● 纯酒精溶液是易燃品,应使其远离火种和电火花并且远离电源开关。
● 当使用纯酒精溶液时要按厂方提供的说明操作。
2 显微镜清洁
● 建议用绒布去清洁油漆和塑料表面。
● 一些较顽固的污物,可以用蘸有中性清洁剂溶液的纱布去擦洗
● 不要使用有机溶液如酒精溶液、乙醚及油漆稀释剂清洁显微镜主机。
否则会造成油漆或塑料表面褪色或字体脱落。
3 显微镜消毒
● 建议使用70%的药用酒精进行日常的显微镜清洁
● 万一样品溅落到显微镜上,确定样品是否有危害,如果有危害,请依据实验室标准程序进行净化
● 使用有机溶剂可能会导致塑料部件的脱色
4 显微镜的存放
● 当显微镜不使用时,用防尘罩盖上,放在不易生霉的干燥的地方。
● 在盖上防尘罩之前,请关闭显微镜电源开关(按下开关的前半部)并且等灯泡完全冷却。
● 我们特别建议物镜和目镜安放在干燥的容器内(如放有干燥剂)。
5 定期检查
● 显微镜安全定期检查以保持其最佳性能状态。
● 关于定期检查的详细要求请与就近尼康代理商取得联系。
E-86
VIII技术规格
(1)型号 ECLIPSE TS100
ECLIPSE TS100-F
(2)尺寸与重量
ECLIPSE TS100:228(宽)×517(长)×480(高)mm,7.5kg
ECLIPSE TS100-F: 228(宽)×517(长)×480(高)mm,8.1kg
(3) 光学系统
无限远校正光学系统
(4) 目镜 10x 视场数: 22mm
(5) 显微镜主体放大倍数
1x
(6) 透射照明
ELWD聚光镜 N.A.=0.3, 工作距离=75mm
不装聚光镜 工作距离=190mm
(7) 相衬显微术装置
用于长工作距离的聚光镜PhL,Ph1,ph2
(8) 瞳距调节范围 50mm至75mm
(9) 物镜转换器
5孔
(10) 调焦装置
微调焦手轮刻度每格2um
微调焦手轮行程每圈0.2mm
粗调焦手轮行程每圈37.7mm左右
物镜转换器上下移动范围,在载物台参考位置向上7mm向下2mm
(11) 落射荧光附件
(12) 仅TS100-F规格
● 垂直镜筒 可安装C接口和显微照相接口
● 光路转换钮 1) 观察100%,目镜筒0%
2) 观察0%,目镜筒100%
E-87
(13) 电气规格
● 灯泡 6V-30W卤素灯(PHILIPS 5761)
● 输出 6V 5A(最大)
● 输入
用于 100,110和120V AC区域的型号
输入电压在:根据在AC插座内所放置的保险丝,选择100V、110V或120V
频率: 50-60Hz
电压波动: ±10%
额定电流: 小于等于0.8A
保险丝: 250V,1A延时型,高熔断型5x20小型保险丝2个
电源线: 只能使用下面指定的电源线,如果使用错误的电源线将导致火灾的危险
1级保护装置应与地线(PE)末端相连。
● 通过UL标准的即插电源线,三芯接地SVT,No.18AWG,最长3m, 额定电压125VAC
用于220,230,240V AC区域的型号
输入电压 根据在AC插座内所放置的保险丝,选择220V,230V或240V
频率 50/60Hz
额定电压波动 ±10%
额定电流 小于等于0.4A
保险丝 250V,1A延时型高熔断型5x20小型保险盒2个
电源线 只能使用下面指定的电源线,使用不当的电源线可能导致火灾的危
险。1级保护设置应与地线(PE)末端相连。
3m,额定
● 通过EU/EN标准的三芯接地型电源线H05VV-F, 最长 电压250V AC。
● 保护级: 1级
(14) 操作环境条件
● 温度: 0至+40℃
● 湿度: 相对湿度最大为85%,不结露。
● 海拔高度: 最大海拔高度2000米
● 污染: 2级
● 设施类型(过压类别): 2级
● 仅室内使用
E-88
(15)保管与运输环境条件
● 温度: -20至+60℃
● 湿度: 相对湿度最大为90%(不结露)。
(16) 符合标准
● 用于100,110,和120V AC区域型号是UL标准
● 用于220,230,和240V AC区域型号满足E低电压标准
● 用于220,230,和240V AC区域型号满足EU EMC标准
(用于100,110和120V AC区域型号不在FCC之内)
E-89
产品配置: